Otra utilidad de Tn-seq: Búsqueda de genes novedosos en sistemas bien estudiados como la esporulación en Bacillus subtilis

En este trabajo realizaron un screening de genes implicados en la esporulación de Bacillus subtilis mediante una aproximación de Tn-seq. Se construyó una biblioteca de inserciones de transposones, se secuenciarion en masse las regiones flanco de dichas inserciones y se analizó la diferencia en la frecuencia de lecturas en el tiempo cero (T0, el inicio de la inanición), 5 horas  (T5) y 24 horas (T24) después.  Este proceso ha sido estudiado por más de 50 años y es uno de los mejores caracterizados, sin embargo, fue posible identificar 24 genes de esporulación que no habían sido implicados en éste proceso anteriormente. Se investigaron las funciones de estos genes monitoreando por microscopia de fluorescencia las etapas de diferenciación y se identificaron mutantes que muestran un restraso en la esporulación y otros que presentan una esporulación temprana. Los resultados evidenciaron la capacidad de utilizar una aproximación de Tn-seq para el descrubrimiento de nuevos genes implicados en procesos «bien conocidos».

Obtenido de Meeske et al., 2016

Bibliografía:

Meeske AJ, Rodrigues CDA, Brady J, Lim HC, Bernhardt TG, Rudner DZ (2016) High- Throughput Genetic Screens Identify a Large and Diverse Collection of New Sporulation Genes in Bacillus subtilis. PLoS Biol 14(1): e1002341.doi:10.1371/journal.pbio.1002341